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      mile米乐m6集团 /药靶模型 /激酶靶点 /PDGFRA /PDGFRA D842V-T674I/BaF3

      PDGFRA D842V-T674I/BaF3

      CBP73335

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      I. Background

            PDGFRA 基因位于人类 4 号染色体 4q12 位点,编码血小板衍生生长因子受体α (PDGFRA),属于酪氨酸激酶受体家族,正常参与细胞增殖、存活、迁移及血管生成调 控;其突变或融合(如 D842V 突变、FIP1L1-PDGFRA 融合基因)可导致受体持续激活, 驱动多种肿瘤发生,包括约 5%-15%的胃肠道间质瘤(GIST,多见于胃部,对伊马替尼敏 感但 D842V 耐药)、嗜酸粒细胞增多综合征(HES,如 FIP1L1-PDGFRA 融合患者伊马替 尼治疗有效率超 90%)、胶质瘤及部分特发性肺纤维化等;检测方法涵盖 PCR、测序、 FISH、数字 PCR 及液体活检(ctDNA 监测)。 

       
      II. Description

            PDGFRA[D842V_T674I] BaF3 药靶细胞,顺利获得转导突变状态的 PDGFRA[D842V_T674I] 基因到 BaF3 细胞系中,稳定表达 人突变形态下的 PDGFRA[D842V_T674I] 基因。

            BaF3(小鼠原 B 细胞)的生长和增殖需要 IL-3 的维持。顺利获得引入各种表达激酶的基因,能作为 BaF3 的驱动基因,让 BaF3 不再依赖 IL-3 而增殖,进而激酶基因成为 BaF3 增殖依赖的驱动基因,用于评估小分子药物对激酶的靶向抑制作用,原理及流程见下图所示。 

       

      Figure 1. PDGFRA[D842V_T674I] BaF3 细胞的构建原理图

       
      III. Introduction

      Cell Line Name:

      PDGFRA D842V-T674I/BaF3

      Host Cell:

      BaF3

      Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
      Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO

      Complete Culture Medium:

      RPMI-1640+10%FBS

      Mycoplasma Status:

      Negative

       
      IV. Representative Data

      1. WB of PDGFRA D842V-T674I/BaF3

      Figure 2. WB of PDGFRA D842V-T674I/BaF3.

      2.Sanger of PDGFRA D842V-T674I/BaF3

      Figure 3. PDGFRA D842V-T674I/BaF3 T674I

      Figure 4. PDGFRA D842V-T674I/BaF3 D842V

      3. Anti-proliferation assay

       

      Figure 5. CTG Proliferation Assay of PDGFRA [D842V&T674I ] BaF3(C4).

       

       

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